listdir仅返回文件名：https://docs.python.org/2/library/os.html#os.listdir您需要完整路径才能打开文件。在打开文件之前，还要检查以确保它是文件。下面的示例代码。
for filename in os.listdir(seqdir):
fullPath = os.path.join(seqdir, filename)
if os.path.isfile(fullPath):
in_file = open(fullPath,'r')
#do you other stuff
但是，对于文件，最好使用with关键字打开。即使有例外，它也会为您处理关闭。有关详细信息和示例，请参见https://docs.python.org/2/tutorial/inputoutput.html#methods- of-file-objects
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